Enzima do citocromo P450 dependente de NADH que cataliza a oxidação da cadeia lateral do intermediário de esterol, como a 27 hidroxilação do 5-beta-colestano-3-alfa,7-alfa, 12-alfa-triol. A CYP27A1 do citocromo P450 é uma enzima mitocondrial, entretanto homólogos derivados do microssomo da enzima foram identificados e são incluídos sob este título.